"SCC-15 Thawing人鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SCC-15 Thawing人鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４-１：８傳代，２-３天換液１次。
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SCC-15 Thawing人鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
RGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
H1092細胞系相關產(chǎn)品：MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
BLO 11細胞系相關產(chǎn)品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
HOS(TE85)細胞系相關產(chǎn)品：HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
130-T細胞系相關產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
Panc 8.13細胞系相關產(chǎn)品：BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞
MOLT4細胞系相關產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
HEK293-A細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
Kasumi 1細胞系相關產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
SUM149-PT細胞系相關產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
578T細胞系相關產(chǎn)品：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
IGROV-1細胞系相關產(chǎn)品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
TSCC1細胞系相關產(chǎn)品：SW-756細胞、GA-10-Clone-4細胞、Tu-686細胞
HCC0827細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、SUM102細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
HNE-3細胞系相關產(chǎn)品：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
AMC-HN-8細胞系相關產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
Ramos 1細胞系相關產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
RPMI 8402細胞系相關產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
Y79細胞系相關產(chǎn)品：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
SLK細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
Hs 675.T細胞系相關產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
SCC 4細胞系相關產(chǎn)品：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞
Hs 274.T細胞系相關產(chǎn)品：KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產(chǎn)品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
SCC-15 Thawing人鱗狀細胞癌細胞系
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
BEL 7404細胞系相關產(chǎn)品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
BNL.CL2細胞系相關產(chǎn)品：TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
L 1210細胞系相關產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
H1581細胞系相關產(chǎn)品：HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
HSCT6細胞系相關產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
H-378細胞系相關產(chǎn)品：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
RAW-264.7細胞系相關產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
LAN-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
MDA-453細胞系相關產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
NCI-SNU-398細胞系相關產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
NCI-H2195細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
4T1-A細胞系相關產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
KAT5細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
LX-2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
C8-D1A細胞系相關產(chǎn)品：MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
SJRH30細胞系相關產(chǎn)品：HMEL細胞、SKOV3細胞、WEHI 164 TC細胞
SUDHL10細胞系相關產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
BEL7405細胞系相關產(chǎn)品：GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞
Evsa T細胞系相關產(chǎn)品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
HREC細胞系相關產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
MRC9細胞系相關產(chǎn)品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
J774 A.1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
Becker細胞系相關產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
RAG細胞系相關產(chǎn)品：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
HCC1806細胞系相關產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
OVISE細胞系相關產(chǎn)品：HCC1954BL細胞、H2087細胞、HM細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
SCC-15 Thawing人鱗狀細胞癌細胞系
ATN1細胞系相關產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
SF-763細胞系相關產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
NCI-H-295細胞系相關產(chǎn)品：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
JAR細胞系相關產(chǎn)品：SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
RMG-I細胞系相關產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
EHEB細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
SW-962細胞系相關產(chǎn)品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
2BS細胞系相關產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
"