"MKN1 Thawing人胃癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MKN1 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MKN1 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
5-8F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、ROS17/28細胞、MES-23.5細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細胞、TT細胞、SK-OV-433細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
MKN1 Thawing人胃癌細胞系
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
MLA144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
IHH4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
SK-Mel1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
SK-Mel1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
J774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
MKN1 Thawing人胃癌細胞系
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
OCI-Ly 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細胞、C4-2細胞、NTHY-ORI3.1細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
YAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
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