"Malme-3M Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
Malme-3M Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Malme-3M Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：混合生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
A375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞
EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、CX-1細(xì)胞
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞
SW-1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/S3細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞
Malme-3M Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
H-196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2009細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、CL11細(xì)胞
SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
Malme-3M Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
DSL-6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-420細(xì)胞、MDA175細(xì)胞、A427細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞
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