"HMCB Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HMCB Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６—１：１０傳代，２天換液１次
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HMCB Thawing人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
【懸浮型細胞的傳代操作】１)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。【注意事項】１)嚴格的無菌操作；２)適度消化：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時調節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
VCaP細胞系相關產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
JHH-2細胞系相關產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
RCM1細胞系相關產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
TGBC11T細胞系相關產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
RPMI-8226細胞系相關產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
L-M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產(chǎn)品：SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
87MG細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
MADB-106細胞系相關產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
TSCCa細胞系相關產(chǎn)品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
HT 1376.T細胞系相關產(chǎn)品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
HOP-92細胞系相關產(chǎn)品：L-WRN細胞、RPMC細胞、Ramos (RA)細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品：293T細胞、HCT15細胞、Adeno 293細胞
L-M[TK-]細胞系相關產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
CORL23細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
NCl-H157細胞系相關產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
OAW-42細胞系相關產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
H-1944細胞系相關產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
H-1944細胞系相關產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
GM05384細胞系相關產(chǎn)品：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
HBL 100細胞系相關產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
Wien 133細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關產(chǎn)品：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
HMCB Thawing人黑色素瘤細胞系
SACCLM細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
SUPB-15細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
CNE-1細胞系相關產(chǎn)品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
CCRF-CEM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
JOSK-M細胞系相關產(chǎn)品：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
NBL-2細胞系相關產(chǎn)品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
NCI H295R細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
PG-BE1細胞系相關產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
HASMC細胞系相關產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
SNU878細胞系相關產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
QBC(939)細胞系相關產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
BHP-10細胞系相關產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
NPA'87細胞系相關產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
rHSC-99細胞系相關產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
OCI-Ly07細胞系相關產(chǎn)品：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
ND7/23細胞系相關產(chǎn)品：BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
RH-30細胞系相關產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
H87細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
H-1975細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
HCC2108細胞系相關產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
LADMAC細胞系相關產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
G 401細胞系相關產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
BT325細胞系相關產(chǎn)品：QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞
FAK+/+細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
A-20細胞系相關產(chǎn)品：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
SK-N-F1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
SNU-601細胞系相關產(chǎn)品：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
HMCB Thawing人黑色素瘤細胞系
EU-2細胞系相關產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
H209細胞系相關產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
RPMI1788細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
4-1st細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
GC-1細胞系相關產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
WM 239A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
MKN 45細胞系相關產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
"