"PA-1 Thawing人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
PA-1 Thawing人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2-3次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PA-1 Thawing人卵巢畸胎瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
HCEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細胞、CCF-STTG1細胞、Tn-5B1-4細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細胞、SUNE-1細胞、H-1417細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
EC-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
SVG(P12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞
PA-1 Thawing人卵巢畸胎瘤細胞系
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞
COS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
PA-1 Thawing人卵巢畸胎瘤細胞系
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
SUDHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
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