"A-673 Thawing人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
A-673 Thawing人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-673 Thawing人橫紋肌肉瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
WM451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、COV-362細胞、EFM192A細胞
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK細胞、RK-13細胞、SU-86-86細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
A-673 Thawing人橫紋肌肉瘤細胞系
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
Panc02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞
SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
A-673 Thawing人橫紋肌肉瘤細胞系
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
PF-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
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