"NCI-H2141 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
NCI-H2141 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書,包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長的慢,買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:3-4天換液1次。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法,希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細(xì)胞狀態(tài):貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%,即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài);2)細(xì)胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細(xì)胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細(xì)胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí),立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài),至細(xì)胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細(xì)胞離心:將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細(xì)胞凍存:離心后去除細(xì)胞上清液,按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進(jìn)行凍存;6)細(xì)胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2141 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮生長
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對(duì)細(xì)胞代數(shù),對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤洗,都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:聚團(tuán)懸浮
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
Liver-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1623細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、H-748細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞
SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞
WiDr-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
NCI-H2141 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
HCC1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細(xì)胞、3T6細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞
WM239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320D細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞、TU 686細(xì)胞
SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
NCI-H2141 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
UCLA RO-81-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
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