"NCI-H2029 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H2029 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
解凍細(xì)胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：５傳代；
細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實驗，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2029 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞
AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞
EHEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞
RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
CAL120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
NCI-H2029 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
Adeno 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞、U-251細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞
HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
Okayama University Medical School-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞、2008細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
CTLA4 Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1-sq細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
NCI-H2029 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
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