"NCI-H146 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H146 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：６傳代，每周換液２-３次
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H146 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細胞、ASH3細胞、C8-D1A細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、PC-10細胞、LU65細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
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H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
QBI-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
NCI-H146 Thawing人小細胞肺癌細胞系
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞
CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
KALS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
NCI-H146 Thawing人小細胞肺癌細胞系
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
FAO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
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