"NCI-H69 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H69 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２次
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H69 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)，聚團(tuán)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：聚團(tuán)懸浮
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
SKMES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG63細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞、SW-982細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
KALS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、H-740細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
Mono Mac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
NCI-H69 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
RT112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細(xì)胞、P 815細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
Bowes melanoma cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
NCI-H69 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
MCF10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H647細(xì)胞、GP5d細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞
NCI-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM1細(xì)胞、H1522細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞
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