"NCI-H1876 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NCI-H1876 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:每周換液2次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H1876 Thawing人小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
JeKo-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
Walker-Ca.256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 177細胞、CP70細胞、Evsa-T細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、H-2286細胞、CHAGOK1細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
P3J-HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
DMS 153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
NCI-H1876 Thawing人小細胞肺癌細胞系
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
SKCO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
HO1N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細胞、Clone M-3細胞、VMM5A細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
SK-ChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
OV1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
NCI-H1876 Thawing人小細胞肺癌細胞系
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
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