"DMS 114 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
DMS 114 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
DMS 114 Thawing人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95-D細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、PA317細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
Clone Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞
DMS 114 Thawing人肺癌細(xì)胞系
H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞
751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞
Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞
SNU878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、A-875細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
ECC12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-EBNA細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
NRK-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞、PC9細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
A7r5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細(xì)胞、HuH6細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
DMS 114 Thawing人肺癌細(xì)胞系
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞
RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞
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