"NCI-H2405 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H2405 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：５-１：８?jìng)鞔?/span>
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H2405 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：混合生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
TE-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、ML2細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
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BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細(xì)胞、L-929細(xì)胞、SW 756細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
NCI-H2405 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
Tca-8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
SF 126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞
LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
P31/FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
NCI-H2405 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
Cattle chondrocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細(xì)胞、S37細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
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