"NCI-H2087 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NCI-H2087 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓:不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H2087 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
細胞生長特性:懸浮生長,有少數(shù)細胞疏松貼壁
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
SW-1116細胞系相關產(chǎn)品:CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
CPA47細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
NCIH28細胞系相關產(chǎn)品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品:BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
GalK 1細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
GTL16細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
PLA801-95C細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
BT474細胞系相關產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
Hs706T細胞系相關產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞
KU-812F細胞系相關產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:SVHUC細胞、RPMI7666細胞、LL/2(LLc1)細胞
A-498細胞系相關產(chǎn)品:Raji細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、NCIH1581細胞
WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
MH-S細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
JIMT細胞系相關產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
MDA-MB 231細胞系相關產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
MDA-MB 231細胞系相關產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
A-704細胞系相關產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
MS 751細胞系相關產(chǎn)品:OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
PL 5細胞系相關產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
HBE 135-E6/E7細胞系相關產(chǎn)品:FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
NCI-H2087 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
HOCF細胞系相關產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
KMS-26細胞系相關產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
HBEpiC細胞系相關產(chǎn)品:RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
LN382細胞系相關產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
NCI-H2228細胞系相關產(chǎn)品:HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
AE1201細胞系相關產(chǎn)品:COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
MG-HU-3細胞系相關產(chǎn)品:TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
GM05887細胞系相關產(chǎn)品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
HT 1197細胞系相關產(chǎn)品:RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞
rRTEC細胞系相關產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
mIMCD3細胞系相關產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
Rat Lung-65細胞系相關產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
FL-83B細胞系相關產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品:TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
OVCA433細胞系相關產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
NB.4細胞系相關產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
MH-S細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
SNUC2A細胞系相關產(chǎn)品:A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
CHP-212細胞系相關產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
COV 504細胞系相關產(chǎn)品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
B16F10細胞系相關產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
231-luc細胞系相關產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
UCH1細胞系相關產(chǎn)品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
CCD 1112SK細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
NCI-H2087 Thawing人非小細胞肺腺癌細胞系
SK-BR3細胞系相關產(chǎn)品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品:OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
NTera2/D1細胞系相關產(chǎn)品:PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
MCFs細胞系相關產(chǎn)品:HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
CEM-T4細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
RWPE1細胞系相關產(chǎn)品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
ME180細胞系相關產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
SK.OV.3細胞系相關產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
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