"SMMC-7721 cell line人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:用Northernblot方法,未能檢測到細(xì)胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達(dá)。
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時(shí),易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細(xì)胞傳代時(shí)建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化,對于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化,細(xì)胞密度過高超過80%時(shí),采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進(jìn)行,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機(jī)會。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細(xì)胞碎片增多,黑渣子增多,細(xì)胞會成片脫落,嚴(yán)重影響細(xì)胞活性,并有部分細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時(shí)間也會有差異。胰酶消化時(shí)間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時(shí)間,胰酶的儲存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對于新購買的細(xì)胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時(shí)間,可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓,記錄消化時(shí)間,下一次操作參考之前的記錄來控制時(shí)間即可。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SMMC-7721 cell line人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況把握)。
SMMC-7721 cell line人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
SMMC-7721 cell line人肝癌細(xì)胞系
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細(xì)胞、H510A細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞
RMa-bm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞
WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞
C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32細(xì)胞、PIG1細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
HRA19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
NCI-H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
SMMC-7721 cell line人肝癌細(xì)胞系
SKMEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 520細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞
BpRcl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
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