"SNU-475 cell line人肝癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-475 cell line人肝癌細胞系
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流?!炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
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細胞形態(tài)特性:上皮樣
2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
HBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
SNU-475 cell line人肝癌細胞系
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR細胞、He La細胞、TE14細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
HOS TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
T/G HA VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細胞、H522細胞、C918細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
CORL23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
OCILY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
OCILY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
SNU-475 cell line人肝癌細胞系
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、YD-15細胞、L1210細胞
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細胞、SW-1116細胞、MKN28細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、CA922細胞、CPA 47細胞
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