"NCI-H1650 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:該細胞是從一名27歲白人男性(10年煙齡)支氣管肺泡癌患者的胸腔積液中分離得到的。
細胞培養(yǎng)中常用設施及設備:實驗室設計:細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備:1)超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間:一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等。3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室:顯微鏡、計算機及打印機等。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1650 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;2-3天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
NCI-H1650 cell line人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
DMS153細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
HCC0015細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
NCI-H1650 cell line人非小細胞肺癌細胞系
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
GM12878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
TI-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
NCI-H1650 cell line人非小細胞肺癌細胞系
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
G-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細胞、McA-RH 8994細胞、OV3121細胞
H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、OVCA432_Bast細胞、CT-26 WT細胞
MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細胞、LS 513細胞、MDA MB 361細胞
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