"RKO cell line人結腸癌細胞系
細胞背景資料:RKO是一個低分化的結腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta1)。RKO細胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細胞。RKO細胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RKO cell line人結腸癌細胞系
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
貼壁細胞凍存注意事項:細胞凍存液需提前配制,不可直接將DMSO加入細胞懸液中;不同細胞消化時間有差異,以實際鏡檢結果為準,大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化,消化時間不宜過長;應選擇匯合度80%-90%左右,細胞處于對數生長期時進行凍存操作,確保細胞凍存時狀態(tài),凍存密度可根據細胞特性進行調整;凍存細胞保存溫度應低于-130℃,不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟:從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞;顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄;酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中;吸去多余的培養(yǎng)基,加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;將細胞懸液移入15ml離心管中離心,1000rpm/min(約200g)離心3-5min;吸去多余的液體,向細胞沉淀中加入適量的凍存液,輕輕吸打混勻;按比例分裝至凍存管中;貼好標簽后放入梯度凍存盒中;將凍存盒放入-80℃,降溫過夜后,移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項:將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后,復溫至室溫,備用;程序降溫盒復溫至室溫備用。
RKO cell line人結腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
SF539細胞系相關產品:K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞
RS1細胞系相關產品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
C28/I2細胞系相關產品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
Det. 562細胞系相關產品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
WPE-int細胞系相關產品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
HCC-1428細胞系相關產品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
KG1細胞系相關產品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
H889細胞系相關產品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
NCI-H1915細胞系相關產品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
HGSMC細胞系相關產品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
Ly7細胞系相關產品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
SK-LU-1細胞系相關產品:OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞
RKO cell line人結腸癌細胞系
NTERA-2/D1細胞系相關產品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
H596細胞系相關產品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
Panc10.05細胞系相關產品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
NCIH524細胞系相關產品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
Walker-256細胞系相關產品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
GM05887細胞系相關產品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
NCI-H2196細胞系相關產品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關產品:H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
P-2003細胞系相關產品:SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
OVCA-420細胞系相關產品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
HCEC-12細胞系相關產品:GM-637細胞、HSF2細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞
MO59J細胞系相關產品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
HS578T細胞系相關產品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關產品:Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
HCGC細胞系相關產品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
CAMA-1細胞系相關產品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
FD-LSC-1細胞系相關產品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
TM4細胞系相關產品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞
ETCC007細胞系相關產品:VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
OKAC1細胞系相關產品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
MLMA細胞系相關產品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關產品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
RH7777細胞系相關產品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
253JBV細胞系相關產品:BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
FRH-0201細胞系相關產品:LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
MKN 45細胞系相關產品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
LS180細胞系相關產品:SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
EL-4細胞系相關產品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
P-388細胞系相關產品:ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
GTL-16細胞系相關產品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
GP2-293細胞系相關產品:AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞
H-847細胞系相關產品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
APRE-19細胞系相關產品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
SUPB-15細胞系相關產品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
BIC-1細胞系相關產品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
624mel細胞系相關產品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
Glioma-261細胞系相關產品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
H647細胞系相關產品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
DR2R 1610細胞系相關產品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
JROECL33細胞系相關產品:LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
NCIH747細胞系相關產品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
HOS-MNNG細胞系相關產品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
P3-X63-Ag 8.653細胞系相關產品:NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞
RKO cell line人結腸癌細胞系
Lewis-Lung細胞系相關產品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
SMMC-7721細胞系相關產品:CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
MRC-9細胞系相關產品:NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
NCIH526細胞系相關產品:Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
COLO357細胞系相關產品:NCI-H810細胞、TE3A細胞、HCC-9204細胞
C 6細胞系相關產品:3T3-L1細胞、CT 26細胞、Kasumi 1細胞
639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、HMCB細胞、McCoy B細胞
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