"3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:3T3細(xì)胞株是1962年Todaro G和Green H從分離的瑞士小鼠胚胎中建立的;該細(xì)胞的生長(zhǎng)受接觸性抑制,匯合狀態(tài)的單層細(xì)胞密度為40000個(gè)細(xì)胞/平方厘米;檢測(cè)結(jié)果顯示該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;在中生長(zhǎng)較好,在某些玻璃表面上可能狀態(tài)不佳;細(xì)胞生長(zhǎng)飽和時(shí)其密度可以達(dá)到約50000 cells/cm2。
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
SPC-A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
3T3-Swiss albino fibroblast cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-81細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
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