"3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞背景資料：３T３-L１是從３T３細胞（Swissalbino）中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細胞到脂肪樣細胞的轉(zhuǎn)變。該細胞鼠痘病毒陰性；可產(chǎn)生甘油三酯，高濃度血清可增強細胞內(nèi)脂肪堆積。
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
GFP-Olig2細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
8305-C細胞系相關產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HCC-1806細胞系相關產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
細胞生長：貼壁
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
LLCMK2細胞系相關產(chǎn)品：L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
SW480細胞系相關產(chǎn)品：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HHFK細胞系相關產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
TGHAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
HEK 293細胞系相關產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
SUM-52細胞系相關產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
SNU216細胞系相關產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
H1436細胞系相關產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
A72細胞系相關產(chǎn)品：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
PLC/PRF/5細胞系相關產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
GM03320細胞系相關產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
766T細胞系相關產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
hTERT-RPE細胞系相關產(chǎn)品：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞
M21細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
SCC-25細胞系相關產(chǎn)品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
OCI-LY-18細胞系相關產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
HT clone H9細胞系相關產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
SW 1573細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
Colo-678細胞系相關產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
293-F細胞系相關產(chǎn)品：PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
YTMLC-90細胞系相關產(chǎn)品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
A-253細胞系相關產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
EAhy926細胞系相關產(chǎn)品：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
RT112細胞系相關產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
HCC94細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
LIPF155C細胞系相關產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
COLO 320DM細胞系相關產(chǎn)品：4T1.2細胞、R2C細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞
NCI-H508細胞系相關產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
HPAF-I細胞系相關產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
4T1-A細胞系相關產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
FHC細胞系相關產(chǎn)品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
HuP-T3細胞系相關產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
A375mel細胞系相關產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
PC 61-5-3細胞系相關產(chǎn)品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
SLK細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
KCL22S細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
HCT-GEO細胞系相關產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
SV40-MES13細胞系相關產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
PC-3M細胞系相關產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
COLO.205細胞系相關產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
KYSE-180細胞系相關產(chǎn)品：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
IPEC-J2細胞系相關產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
GDM1細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
ASH3細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
SF295細胞系相關產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
VP303細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
NCI.H460細胞系相關產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
Hs294T細胞系相關產(chǎn)品：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
HeLa S 3細胞系相關產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞系
NCI-H2172細胞系相關產(chǎn)品：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y1細胞、RPMI1788細胞、QGP1細胞
H292細胞系相關產(chǎn)品：SNU620細胞、Hs-746T細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
HEK 293T/17細胞系相關產(chǎn)品：SKML-28細胞、LTEP a2細胞、SY5Y細胞
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