"Duck embryo fibroblast cells鴨子胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
Duck embryo fibroblast cells鴨子胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
DMS-153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞
266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Duck embryo fibroblast cells鴨子胚胎成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維母細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
KYSE-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞
Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞
JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
Duck embryo fibroblast cells鴨子胚胎成纖維細(xì)胞系
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
T24(ECV304)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-15細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞
SCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
KMM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
HCC1954 BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、SW 900細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
FaDu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
SCLC21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
Duck embryo fibroblast cells鴨子胚胎成纖維細(xì)胞系
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞
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