"SK-RC-39 epithelioid cells人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
SK-RC-39 epithelioid cells人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-RC-39 epithelioid cells人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
EM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、T98 G細(xì)胞、TF-1細(xì)胞
SK-RC-39 epithelioid cells人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞
RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞
WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
EMT-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細(xì)胞、MCM細(xì)胞、GA-10細(xì)胞
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
HEK293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞、B4G12細(xì)胞
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
NCI-H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞
H-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
Human podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞
SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞
SK-RC-39 epithelioid cells人腎乳頭狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細(xì)胞、HS578細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、LM1細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
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