"RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
BT-474細胞系相關產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
hTERT-HPNE細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
細胞生長：貼壁
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
H-1688細胞系相關產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
BV173細胞系相關產(chǎn)品：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
NCIH2106細胞系相關產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
HEM-L細胞系相關產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
J-774A.1細胞系相關產(chǎn)品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
CATH.a細胞系相關產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
SKMEL5細胞系相關產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
OVCAR-432細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
SCC9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
TOG細胞系相關產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細胞系
H-64細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
SK-LMS-1細胞系相關產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
Hi-5細胞系相關產(chǎn)品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
NOK細胞系相關產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
CHG-5細胞系相關產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
UMR 106細胞系相關產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
MCA38細胞系相關產(chǎn)品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
C2C12細胞系相關產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
MDA-435細胞系相關產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
KYSE-520細胞系相關產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
GDM1細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
CAL 62細胞系相關產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞
MOLT16細胞系相關產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
OLN93細胞系相關產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
KU1919細胞系相關產(chǎn)品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
MILE SVEN 1細胞系相關產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
Hs 870.T細胞系相關產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
Hs675細胞系相關產(chǎn)品：H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
SW 780細胞系相關產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
4T1-A細胞系相關產(chǎn)品：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產(chǎn)品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
C-643細胞系相關產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
CX-1細胞系相關產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
NCI-H735細胞系相關產(chǎn)品：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
UMC11細胞系相關產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
KU19-19細胞系相關產(chǎn)品：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
P30/OHK細胞系相關產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
RPMI-8226細胞系相關產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
NCI-H1755細胞系相關產(chǎn)品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
GM03671細胞系相關產(chǎn)品：TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
KRC Y細胞系相關產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
HOS(TE85)細胞系相關產(chǎn)品：HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
HCC0827細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
HCC827細胞系相關產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
95-D細胞系相關產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
RL-65 epithelioid cells大鼠肺上皮細胞系
Hep-G2/C3A細胞系相關產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
VP303細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7細胞、KMB17細胞、COC1/CDDP細胞
SK MEL 5細胞系相關產(chǎn)品：OVCA 420細胞、8305C_1細胞、IPLB-SF-21細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HR-1細胞、SHP77細胞
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