"NCI-H847 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
IM9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H847 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H847 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
NCTC-3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
NCI-H847 epithelioid cells人肺癌細胞系
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
H19-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
SCLC-21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
Mel RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
A2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
Earle's L cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
HCC-1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞
NCI-H847 epithelioid cells人肺癌細胞系
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
H-1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細胞、TKB1細胞、B16細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、RBMEC細胞、HCC1954BL細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、SHEE細胞、786O細胞
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