"NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
細胞生長：貼壁
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MHH-CALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
TB1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
B16 subline B78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
NG10815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細胞系
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
HCPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細胞、NCIH2172細胞、C2-C12細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
H-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
CWR22R-V1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
NCI-H1668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞、HOS TE85細胞
Z310細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
SCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
L-428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
Panc-8_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
SUPB-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
JIMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌細胞系
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細胞、HO-8910細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、32D/cl3細胞、SW13細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、HepG2細胞、H2170細胞
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