"HCC1937 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:這株細(xì)胞1995年10月13日最初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌, 用了11.5個月建株。腫瘤分類為TNM IIB期, 3級。BRCA1分析表明這株細(xì)胞是BRCA1 5382C突變純合的, 而來源于同一病人的類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株在這個突變位點(diǎn)上是雜合的。 另兩個家庭成員也有這個突變; 一個同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。這株細(xì)胞有一個后天的TP53突變, 而其野生型等位基因丟失; 一個PTEN基因的后天的純合缺失, 以及多個與乳腺癌發(fā)病機(jī)理相關(guān)的位點(diǎn)上發(fā)生的雜合突變。這株細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
HCC1937 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞接收操作說明:請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用,懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多,當(dāng)然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞,但是,長期經(jīng)驗(yàn)來說,貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細(xì)胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細(xì)胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上,再處理細(xì)胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時(shí)T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴(yán)重的,會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn)),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后,直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;4-5天傳代一次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時(shí)間過長或過短:時(shí)間過長,細(xì)胞死亡;時(shí)間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1937 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細(xì)胞能繼續(xù)生長,同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大,就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以,而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶?!静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回溫;3)新鮮培養(yǎng)基;4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染;4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;5)準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶;6)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi);7)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細(xì)胞;8)打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞
IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞
PC3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NWA細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞
Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞、J 82細(xì)胞
CORL23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
Panc04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92細(xì)胞、NF639細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞
SPCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞
HCC1937 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-50細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
SMMC 7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
SW-948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1573細(xì)胞、CL-34細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
HCC1937 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
MLO-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
FRTL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
GLC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞
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