"MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料:該細胞源自一位54歲患有乳腺導(dǎo)管癌白人女性的胸腔積液。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:6傳代,每周換液2—3次
細胞培養(yǎng)過程中,總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題,一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法,希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助:1)觀察細胞狀態(tài):貼壁細胞密度達到85-90%,即可以細胞凍存形式進行保藏,拍照,記錄細胞狀態(tài);2)細胞清洗:培養(yǎng)皿表面消毒后,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液,加入12mlPBS,輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞,隨后吸除PBS清洗液;3)細胞消化:將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中,完全覆蓋細胞,置于顯微鏡下觀察(期間禁止搖晃培養(yǎng)皿),當(dāng)細胞剛開始脫落時,立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余約0.5ml胰酶,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化,每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài),至細胞成流沙狀完全脫落,轉(zhuǎn)移至生物安全柜中,加入12ml完全培養(yǎng)基,終止消化;4)細胞離心:將終止消化后的細胞懸液吹打均勻,吸取至15ml離心管中,1000r/min(110g),離心3min;5)細胞凍存:離心后去除細胞上清液,按照凍存細胞量5*10^5/ml,吸取凍存液重懸細胞沉淀,吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中,進行凍存;6)細胞保藏:凍存管做好標(biāo)記,放至程序降溫盒中,于4℃冰箱放置30min,轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜,將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞生長特性:松散貼壁生長
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
Hs 281.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、MEC1細胞、MOLT-3細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細胞、H-1417細胞、PANC-10-05細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
Centre Antoine Lacassagne-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞
SPDC-CCL141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEH-2細胞、CHP-126細胞、LTEP a2細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
BPH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H711細胞、HEK;293細胞、Hs-746T細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
Rat Basophilic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
MDA-MB-175-VII Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
CNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞
UWB1.289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
FF-WT-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
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