"LN-18 Thawing人神經膠質瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
LN-18 Thawing人神經膠質瘤細胞系
細胞生長:貼壁
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經80~100目篩網過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LN-18 Thawing人神經膠質瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞凍存知識普及:細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
Hs 606細胞系相關產品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
RKN細胞系相關產品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞
EAHY-926細胞系相關產品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
H295細胞系相關產品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
HKF細胞系相關產品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
Cor L88細胞系相關產品:NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
S3 HeLa細胞系相關產品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
Monomac-1細胞系相關產品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
VCaP細胞系相關產品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
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Madison lung細胞系相關產品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
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PIG1細胞系相關產品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
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CAL27細胞系相關產品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
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LN-18 Thawing人神經膠質瘤細胞系
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JTC-39細胞系相關產品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
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TE-1細胞系相關產品:OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關產品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
RFL 6細胞系相關產品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
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CCRF/CEM/0細胞系相關產品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
CV1細胞系相關產品:OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
LN-18 Thawing人神經膠質瘤細胞系
NCI-BL2141細胞系相關產品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
32D:cl3細胞系相關產品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
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PL 5細胞系相關產品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
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T8細胞系相關產品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
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OS-732細胞系相關產品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
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