"D341 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
D341 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２-３次。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
D341 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：髓母細胞樣
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
BMSCs（mBMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、Granta-519細胞、OAW42細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NHRF細胞、QSG7701細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
CHO-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
D341 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
ID8/MOSEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
CCD33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
D341 Med Thawing人腦髓母細胞瘤細胞系
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
NTERA-2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞
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