"NMC-G1 Thawing人腦膠質(zhì)細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NMC-G1 Thawing人腦膠質(zhì)細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
預(yù)防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NMC-G1 Thawing人腦膠質(zhì)細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
SK-OV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-450細胞、WIL2S細胞、DMS 273細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H69細胞、3396細胞
SUM52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細胞、SNU638細胞、P3J HR1-K細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
NMC-G1 Thawing人腦膠質(zhì)細胞系
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
OVCAR433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞
GRSL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
CTLL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
UCLA-SO-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
NMC-G1 Thawing人腦膠質(zhì)細胞系
Hs-852-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
HT 1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞
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