"MG-63 Thawing人成骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：該細胞源自１４歲患有骨肉瘤的白人男性；聚次黃嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、和D可以誘導(dǎo)產(chǎn)生高水平的干擾素。該細胞表達TGF-β受體Ⅰ和Ⅱ。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
MV(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC12(高分化)細胞、WISH細胞、451-LU細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
SupB15WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細胞、IGROV 1細胞、ME 180細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、NCI-H295細胞、H1993細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、H-2444細胞、HPAF細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
PA-TU-8988S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
201T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞
WEHI231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
Calu 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN6細胞、H220細胞、K299細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細胞系
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
OAW 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
TGBC-11-TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞
MG-63 Thawing人成骨肉瘤細胞系
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞
SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
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