"GH3 Thawing大鼠垂體瘤細胞系
細胞背景資料:GH3細胞系是由TashjianAH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細胞系不是直接來源于GH1細胞系的克隆,而是從原代培養(yǎng)的GH1細胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細胞比GH1分泌更高水平的生長激素,也可產生催乳素。對調控GH3細胞分泌蛋白類激素的研究表明,化可的松可以刺激生長激素的分泌、抑制催乳素的產生。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
GH3 Thawing大鼠垂體瘤細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
GH3 Thawing大鼠垂體瘤細胞系
細胞生長特性:疏松貼壁,有漂浮的細胞簇
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經驗總結,這里說一些我個人的經驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
BC-027細胞系相關產品:MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
SHSY5Y細胞系相關產品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
TE 32細胞系相關產品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
HCC-1428細胞系相關產品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
E.L.4細胞系相關產品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
Hs940T細胞系相關產品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
OVCAR.8細胞系相關產品:H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞
EFO-27細胞系相關產品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
M1細胞系相關產品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
FTC133細胞系相關產品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
Kit-225-K6細胞系相關產品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
HR1K細胞系相關產品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
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769-P細胞系相關產品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
SK.OV.3細胞系相關產品:HME1細胞、H-2110細胞、U20S細胞
H1954細胞系相關產品:Eca109細胞、KNS-42細胞、HO-8910PM細胞
LTEP-a-2細胞系相關產品:BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
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HS-294-T細胞系相關產品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
NCIH322細胞系相關產品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
HR-8348細胞系相關產品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
HT 1197細胞系相關產品:RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞
PC-3M 2B4細胞系相關產品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
GH3 Thawing大鼠垂體瘤細胞系
DMS 79細胞系相關產品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
373MG細胞系相關產品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
N2a細胞系相關產品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
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SAS細胞系相關產品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
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8505C細胞系相關產品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
KU812-F細胞系相關產品:639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
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PG-4 S+L-細胞系相關產品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
GM05887細胞系相關產品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞
SKG-3a細胞系相關產品:TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
Ca-Ski細胞系相關產品:LIM1215細胞、KPNRTBM1細胞、L-1210細胞
GH3 Thawing大鼠垂體瘤細胞系
293-EBNA細胞系相關產品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
Panc-10.05細胞系相關產品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
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IAR 20細胞系相關產品:NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
P 3 HR 1細胞系相關產品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
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WB F344細胞系相關產品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
OCI-LY-19細胞系相關產品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
HCET細胞系相關產品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
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