"MPC-11 Thawing小鼠漿細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MPC-11 Thawing小鼠漿細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MPC-11 Thawing小鼠漿細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
EC-9706細胞系相關產品：LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
SK-N-MC細胞系相關產品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
H2405細胞系相關產品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
MM1細胞系相關產品：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
OAW 42細胞系相關產品：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
WIL2-S細胞系相關產品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
CAKI 2細胞系相關產品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
alpha-TC1.6細胞系相關產品：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
UK Pan-1細胞系相關產品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
IM 9細胞系相關產品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
B16/F1細胞系相關產品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
BT-20細胞系相關產品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
MFHL-2細胞系相關產品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
Oka-C1細胞系相關產品：H-719細胞、SN12-PM6細胞、SKMEL28細胞
EOC 20細胞系相關產品：SK-N-BE(1)n細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、NCI-H1648細胞
M059K細胞系相關產品：NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
Bx-PC3細胞系相關產品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
NCI-H2291細胞系相關產品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
H-1666細胞系相關產品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
J774A.1細胞系相關產品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
J774A.1細胞系相關產品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
10T1/2細胞系相關產品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
GM05384細胞系相關產品：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
DMS153細胞系相關產品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
MPC-11 Thawing小鼠漿細胞瘤細胞系
H2030細胞系相關產品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
A72細胞系相關產品：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
LNT-229細胞系相關產品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
RM-1細胞系相關產品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
PANC0327細胞系相關產品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
HOS/MNNG細胞系相關產品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
U-937細胞系相關產品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
FET細胞系相關產品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
YH-13細胞系相關產品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關產品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
NK10a細胞系相關產品：HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
NCI-H1694細胞系相關產品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
H-719細胞系相關產品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
OVCAR-433細胞系相關產品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
RAOEC細胞系相關產品：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
H-1944細胞系相關產品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
G422細胞系相關產品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
IMR32細胞系相關產品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
MZCRC1細胞系相關產品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
NCI-H1693細胞系相關產品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
SK-MEL 28細胞系相關產品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
J82細胞系相關產品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
McA-RH8994細胞系相關產品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
A704細胞系相關產品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
KRC/Y細胞系相關產品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
BHP 10-3細胞系相關產品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
CMT64細胞系相關產品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
BJ1細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
HD11細胞系相關產品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
WM-2664細胞系相關產品：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
HFL-1細胞系相關產品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關產品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
A375S2細胞系相關產品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
MPC-11 Thawing小鼠漿細胞瘤細胞系
Ball 1細胞系相關產品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
VMM5細胞系相關產品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
H-4-II-E細胞系相關產品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關產品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
Rin-M-5F細胞系相關產品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
GM3569細胞系相關產品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
HNE-3細胞系相關產品：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
NCI H69細胞系相關產品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
A-9細胞系相關產品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
HT-1080細胞系相關產品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
Mia PACA 2細胞系相關產品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
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