"EOMA Thawing小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
EOMA Thawing小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
EOMA Thawing小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
OCI AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
HCC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞
EOMA Thawing小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞系
EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
H-1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
HCC9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
NCI.H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞
HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
NCIH345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
EOMA Thawing小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞系
CEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞
Clone Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
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