"AML12 Thawing小鼠肝細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
AML12 Thawing小鼠肝細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AML12 Thawing小鼠肝細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
實驗室細胞培養(yǎng)基知識簡介：干粉培養(yǎng)基：以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認同了；無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
IOSE 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
YAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、A375-SM細胞、SK-MEL-28細胞
HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB985細胞、MKN45細胞、SUDHL-1細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
MFM223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
AML12 Thawing小鼠肝細胞系
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
COLO 320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
NCI-H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
HCC366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細胞、KYSE70細胞、GM00637H細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
HCCC9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
AML12 Thawing小鼠肝細胞系
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
CoCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
RMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
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