"HEC-1-B Thawing人子宮內膜癌細胞系
細胞背景資料：該細胞是H.Kuramoto１９６８年分離的HEC-１-A細胞亞株。不同於HEC-A-１的是：該亞株在培養(yǎng)第１３５天到１９０天之間表現出穩(wěn)定的生長周期，且重現扁平，與親本細胞系相比更具鋪路石式樣。此外主要染色體組是親本細胞的兩倍。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HEC-1-B Thawing人子宮內膜癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
HEC-1-B Thawing人子宮內膜癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經驗總結，這里說一些我個人的經驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
KP-N-RT-BM-1細胞系相關產品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
LN 229細胞系相關產品：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞
HRMC細胞系相關產品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
SW-13細胞系相關產品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
RAW264細胞系相關產品：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
SUM 52細胞系相關產品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
PL9細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
Ku812F細胞系相關產品：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
MCF-12F細胞系相關產品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
H1522細胞系相關產品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
HCC1954細胞系相關產品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
CAL148細胞系相關產品：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
OCI-Ly07細胞系相關產品：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞
MCF12A細胞系相關產品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關產品：L- cell細胞、TOV-112細胞、K299細胞
SCC9細胞系相關產品：NCI-H2135細胞、NCI-H1734細胞、NCI-H2009細胞
639-V細胞系相關產品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
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T-HEECs細胞系相關產品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
786-0細胞系相關產品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
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H774細胞系相關產品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
GFP-Olig2細胞系相關產品：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
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HEC-1-B Thawing人子宮內膜癌細胞系
ONS-76細胞系相關產品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
MCF-12A細胞系相關產品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
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MKN 28細胞系相關產品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
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SuDHL 10細胞系相關產品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
HEC-1-B Thawing人子宮內膜癌細胞系
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P3/ag細胞系相關產品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
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KATO 3細胞系相關產品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
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KYSE 30細胞系相關產品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
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