"OS-RC-2 Thawing人腎癌細胞系
細胞背景資料：來源于日本人的腎臟腫瘤細胞。 可以移植到裸鼠。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
OS-RC-2 Thawing人腎癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
OS-RC-2 Thawing人腎癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
CNE-1細胞系相關產品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
NCM460細胞系相關產品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
Psi-2 DAP細胞系相關產品：HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞
OV-2008細胞系相關產品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
Bac 1.2F5細胞系相關產品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
EU-2細胞系相關產品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
RPMI6666細胞系相關產品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
SU-86-86細胞系相關產品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
OCI-LY-10細胞系相關產品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
TOG細胞系相關產品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
HCC 94細胞系相關產品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關產品：58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
GP5d細胞系相關產品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
HeLa/DDP細胞系相關產品：COLO 320細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞
UACC 812細胞系相關產品：RL-952細胞、VERO76細胞、NE1細胞
HCT FET細胞系相關產品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
KM12SM細胞系相關產品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
H676B細胞系相關產品：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
Hs832T細胞系相關產品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
MDA 1386細胞系相關產品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
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SKMEL3細胞系相關產品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
PaTu8988s細胞系相關產品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
H1563細胞系相關產品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
H2052_MM細胞系相關產品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
OS-RC-2 Thawing人腎癌細胞系
3 LL細胞系相關產品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
VP267細胞系相關產品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
U-138MG細胞系相關產品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NCI-H1703細胞系相關產品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
TO 175.T細胞系相關產品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
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CHO cell clone K1細胞系相關產品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關產品：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
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CL1細胞系相關產品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
MM134細胞系相關產品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關產品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
Ishikawa細胞系相關產品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
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SN12C細胞系相關產品：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
SUM159PT細胞系相關產品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
SW 527細胞系相關產品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
NB19細胞系相關產品：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
MEC-1細胞系相關產品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
Panc8.13細胞系相關產品：GM04680細胞、Nb2a細胞、NCIH660細胞
HRA-19細胞系相關產品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
HNTEC細胞系相關產品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
343MG細胞系相關產品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
T47D:A細胞系相關產品：PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
130-T細胞系相關產品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產品：NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
PFSK1細胞系相關產品：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
TSCCa細胞系相關產品：UWB1-289細胞、Hs 863.T細胞、OCI-LY-8細胞
OS-RC-2 Thawing人腎癌細胞系
H-1755細胞系相關產品：NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
SNK-6細胞系相關產品：Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
SNK-6細胞系相關產品：Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
EoL-1細胞系相關產品：MEG-01細胞、U-138-MG細胞、C-Li-7細胞
PL-9細胞系相關產品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
HIT-T15細胞系相關產品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關產品：U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關產品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
OCI/AML5細胞系相關產品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
H2196細胞系相關產品：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產品：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
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