"Caki-2 Thawing人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源自一位６９歲白人男性的初期腎腺癌組織
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
Caki-2 Thawing人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Caki-2 Thawing人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞
SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_FI細(xì)胞、A72細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
Caki-2 Thawing人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
D341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
C3H 10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA 46細(xì)胞、H2126細(xì)胞、HCC44細(xì)胞
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞
Caki-2 Thawing人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
ESC-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-143B細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
RL95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
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