"MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是1977年由CailleauR等從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但此細(xì)胞株始終表現(xiàn)為G6PDA表型。P53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導(dǎo)致Arg→His替代。每個細(xì)胞上存在1×106個EGF受體。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項:實(shí)驗進(jìn)行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗操作。實(shí)驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實(shí)驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實(shí)驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細(xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞
CX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH7777細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞、H-716細(xì)胞
RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
GM00637B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞
NCIH244細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細(xì)胞、MF2059細(xì)胞、EJ細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、RSMC細(xì)胞
SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
BT 325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
KOPN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 94細(xì)胞、OE-19細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞
NPA87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細(xì)胞、Y3細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞
SK-MEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
SCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-253細(xì)胞、Fu97細(xì)胞、TEC細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
MDA-MB-468 Thawing人乳腺癌細(xì)胞系
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
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