"SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:這株細(xì)胞源自胸水。沒有病毒顆粒。亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲。SK-BR-3細(xì)胞株過表達(dá)HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動(dòng)作要輕,以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細(xì)胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括對(duì)營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
MHCC-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細(xì)胞、LL2細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
KP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞
CCD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
KYSE 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
OCI-Ly 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細(xì)胞系
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
BC-020細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
Kit 225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1385細(xì)胞、251 MG細(xì)胞、VMM5細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
Hs819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細(xì)胞、H-524細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
Hs 695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
Hs 706.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
L-5178-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞
HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細(xì)胞系
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
RH35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞
U-138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞
LA-795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
IBRS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
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