"J82 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞背景資料:電子顯微鏡下未觀察到橋粒但觀察到數(shù)目不同的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和突出微絲。 含ras (H-ras)癌基因。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
J82 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞生長:貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
預(yù)防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
J82 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、NK-92.05細胞、COLO-824細胞
SNU354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細胞、Rat 2細胞、OCI-AML5細胞
S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
DCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
J82 Thawing人膀胱移行癌細胞系
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
Hs675細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
G-292, clone A141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
AQ-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
J82 Thawing人膀胱移行癌細胞系
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
SKGT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
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