"OPM-2 Thawing人骨髓瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
OPM-2 Thawing人骨髓瘤細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OPM-2 Thawing人骨髓瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
T84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
IOSE80UBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細胞、CCD-841CoTr細胞、tdott細胞
HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細胞、H-2342細胞、KNS62細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
OPM-2 Thawing人骨髓瘤細胞系
CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
H-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
OPM-2 Thawing人骨髓瘤細胞系
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
NBL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞
LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
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