"SW480 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：SW４８０源自一位５１歲白人男性患者的原位直腸腺癌，而SW６２０源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細(xì)胞CSAp和直腸抗原３陰性；角蛋白陽性；p５３基因第２７３位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，３０９位密碼子的C→T突變導(dǎo)致Pro→Ser替代；細(xì)胞p５３蛋白表達水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性；未檢測到癌基因N-myc的表達；不表達Matrilysin（一種與腫瘤侵襲相關(guān)的金屬蛋白酶）。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代，１-２天換液一次
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細(xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞
TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、A-549細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞
NCI-H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞、H-196細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞
SGC7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞
OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞
C81-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
LLC-PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR146細(xì)胞、RBE4細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
SW480 Thawing人結(jié)腸癌細(xì)胞系
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞
Adeno-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞
2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細(xì)胞、1301細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞
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