"J774A1 Suspended小鼠單核巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒(méi)有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開(kāi)關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過(guò)少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過(guò)細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過(guò)調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來(lái)調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
J774A1 Suspended小鼠單核巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分
J774A1 Suspended小鼠單核巨噬細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
以下對(duì)初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來(lái)說(shuō),是非常好的開(kāi)門教程:準(zhǔn)備室的設(shè)備:?jiǎn)握麴s水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品柜(放置消毒過(guò)的物品)、包裝臺(tái);配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(jì)(測(cè)量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設(shè)備:液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書寫實(shí)驗(yàn)記錄);必須放在無(wú)菌間的設(shè)備:離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無(wú)菌室的滅菌:定期打掃無(wú)菌室:每周打掃一次,先用自來(lái)水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等,然后用3‰來(lái)蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實(shí)驗(yàn)前滅菌:打開(kāi)紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實(shí)驗(yàn)后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái);實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌準(zhǔn)備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞
A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN1細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞
NCI H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、J45.01細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
J774A1 Suspended小鼠單核巨噬細(xì)胞系
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
VERO C 1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
PK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
RPTEC/TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
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SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
GP-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、LTPA細(xì)胞
A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN1細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
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