"HCC1954 BL Suspended人外周血B細胞系
細胞背景資料：外周血B淋巴細胞；EBV轉(zhuǎn)化；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCC1954 BL Suspended人外周血B細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
E.G7-OVA細胞系相關產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
K1細胞系相關產(chǎn)品：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PaTu8988s細胞系相關產(chǎn)品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
ACC-2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
細胞生長特性：懸浮
HCC1954 BL Suspended人外周血B細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？與CO２一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定；２)酸鈉的作用是什么？酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為５０mM，-２０℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為１mM；３)加入HEPES有何好處？培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer，加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH７.２-７.６條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為１M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培養(yǎng)基中；４)紅的作用是什么？紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；５)谷酰胺的作用是什么？幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置-２０℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基４度冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分裝使用，-２０℃保存。使用時，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培養(yǎng)基中，使其終濃度為２mM培養(yǎng)基。
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關產(chǎn)品：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
HO8910PM細胞系相關產(chǎn)品：TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
kms 11細胞系相關產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
HNE1細胞系相關產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
MOVAS-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
Bat lung細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
293-EBNA1細胞系相關產(chǎn)品：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
G361-mel細胞系相關產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
Fao細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
A2780CP70細胞系相關產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
HCC1954 BL Suspended人外周血B細胞系
Hepa 1-6細胞系相關產(chǎn)品：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
NCI-H2286細胞系相關產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
L-428細胞系相關產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
NCIH647細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
NALM 6細胞系相關產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
B16 subline B78細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL-2細胞、DMS-273細胞、CALU1細胞
High-5細胞系相關產(chǎn)品：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
N-9細胞系相關產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
Hepatoma 22細胞系相關產(chǎn)品：GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
SK-NEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
Loucy細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
V-79細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
HCGC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
OV-1063細胞系相關產(chǎn)品：C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
HCC-1954細胞系相關產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
QGP-1細胞系相關產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
GM03570細胞系相關產(chǎn)品：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
MH-S細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
Becker細胞系相關產(chǎn)品：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞
RCK8細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
UCW 100細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
Colo205細胞系相關產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
EM3細胞系相關產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
FU-97細胞系相關產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
MDA-MB 468細胞系相關產(chǎn)品：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
HCT15細胞系相關產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
H2029細胞系相關產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
HuT-78細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
NCI-H508細胞系相關產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
RS4-11細胞系相關產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
PLC/PRF/5細胞系相關產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
hs 68細胞系相關產(chǎn)品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
PANC-02-03細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
RMS 1598細胞系相關產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
HCC1954 BL Suspended人外周血B細胞系
A375SM細胞系相關產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
WILL2細胞系相關產(chǎn)品：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞
RK-13細胞系相關產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
SK Hep1細胞系相關產(chǎn)品：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
REC 1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
3T6細胞系相關產(chǎn)品：L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
MLFC細胞系相關產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
JB-6細胞系相關產(chǎn)品：H322細胞、GM03571細胞、TE-5細胞
hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、K562/ADR細胞、SKNBE(2)細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品：3T6細胞、SF-767細胞、KOPN8細胞
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