"T2 Suspended人淋巴母細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
T2 Suspended人淋巴母細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數量。
FT-293細胞系相關產品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關產品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
MPP-89細胞系相關產品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
H1048細胞系相關產品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
Pt-K1細胞系相關產品：HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
GL261細胞系相關產品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
細胞生長特性：懸浮生長
T2 Suspended人淋巴母細胞系
細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現這里更徹底，超凈臺內根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
High5細胞系相關產品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
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VP303細胞系相關產品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
AN3-CA細胞系相關產品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
H2342細胞系相關產品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
Rat Skin 1細胞系相關產品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
SKNFI細胞系相關產品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
Panc-03.27細胞系相關產品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
SUM-102細胞系相關產品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
Clone Y1細胞系相關產品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
SPCA1細胞系相關產品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關產品：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
MDA-MB-157細胞系相關產品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
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SKNAS細胞系相關產品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
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OCM-1A細胞系相關產品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
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NCI-H522細胞系相關產品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
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MILE SVEN 1細胞系相關產品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
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SKMEL-24細胞系相關產品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
ME16C細胞系相關產品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
JEKO細胞系相關產品：H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
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Huh-7.5細胞系相關產品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
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Panc-03.27細胞系相關產品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
B16 F1細胞系相關產品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
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EoL-1 cell細胞系相關產品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
IEC 6細胞系相關產品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
HHUA細胞系相關產品：U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞
P30OHK細胞系相關產品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
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Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關產品：TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
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MDA-MB-134VI細胞系相關產品：OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
SUDHL8細胞系相關產品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
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SKml2細胞系相關產品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
H4-II-EC3細胞系相關產品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
H4-II-EC3細胞系相關產品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
MDCK.2細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
H-2122細胞系相關產品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
HEK 293 c18細胞系相關產品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
B16/BL6細胞系相關產品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
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SW 626細胞系相關產品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
ROS17/28細胞系相關產品：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
GH3細胞系相關產品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
VK-2/E6E7細胞系相關產品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
18G3.cl 1細胞系相關產品：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
SACCLM細胞系相關產品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
766T細胞系相關產品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
ARO 81-1細胞系相關產品：FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
X63-Ag8細胞系相關產品：H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
CA-46細胞系相關產品：B-95-8細胞、CCD-1095Sk細胞、PCI-4B細胞
MC116細胞系相關產品：Hs839.T細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
VP303細胞系相關產品：Huh-7細胞、KMB17細胞、COC1/CDDP細胞
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