"HFL-I Adherent人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細(xì)胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細(xì)胞沉淀；用血清重懸細(xì)胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細(xì)胞計數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；配制細(xì)胞凍存液，將凍存液加到細(xì)胞液中，吹打混勻，控制細(xì)胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細(xì)胞懸液按照1ml/支分裝至已標(biāo)記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細(xì)胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細(xì)胞凍存時細(xì)胞狀態(tài)不佳，會嚴(yán)重影響復(fù)蘇時細(xì)胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存前一天細(xì)胞進(jìn)行換液；消化過度也會嚴(yán)重影響細(xì)胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細(xì)胞時為按照溫度梯度進(jìn)行操作，會嚴(yán)重影響細(xì)胞活率。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HFL-I Adherent人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
HFL-I Adherent人胚肺成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:１)培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決；２)細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉，留１０ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度８０%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決；３)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度；４)對于生長不均的貼壁細(xì)胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白)，此時可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞
Hs746-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
HFL-I Adherent人胚肺成纖維細(xì)胞系
LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
HBL 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞
Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
Hs1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細(xì)胞、UT7細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞
KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
Hs-675-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞
Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞
NCI-SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、SNU423細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
HFL-I Adherent人胚肺成纖維細(xì)胞系
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
MHCC97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細(xì)胞、BT474細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE19細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
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