"HCC-44 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCC-44 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
FAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
HCC-44 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎毎鲜情L不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學(xué)者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當(dāng)大，對細胞的傷害也是很大的。
H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
SMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞
MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細胞、H2110細胞、SNU-719細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
CAL27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
HCC-44 Adherent人肺癌細胞系
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
HS 445T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
HCC-44 Adherent人肺癌細胞系
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細胞、VK2細胞、Hs-729-T細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細胞、HeLa/DDP細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
MHCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細胞、CT26.CL25細胞、L363細胞
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