"EFM-192B Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進(jìn)行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，細(xì)胞會成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活性，并有部分細(xì)胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對于新購買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EFM-192B Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、COV 434細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
EFM-192B Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２-３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
aNK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞
SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
HS-729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
NCI-H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細(xì)胞、NHEK細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
CHL-IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
WiDrTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞
EFM-192B Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
CT26-clone 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞、SF 539細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細(xì)胞、A172細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、L-6細(xì)胞、RGB細(xì)胞
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