"MDA-MB-330 Adherent人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時,需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-330 Adherent人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
HPAF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-2細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
Ect1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細(xì)胞、H-676B細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
MDA-MB-330 Adherent人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
【凍存細(xì)胞操作】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 637細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、PK13細(xì)胞
C-Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-780細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
GAK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞
MDA-MB-330 Adherent人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
Lewis Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI231細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞
BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞
BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
SUM 159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
UCLA RO-81A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A/C1細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞、U-251細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞
SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
MDA-MB-330 Adherent人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
NP69SV40T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細(xì)胞、HOEC細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
SU-DHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞
SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細(xì)胞、7860細(xì)胞、CAL120細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、697細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
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